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[求助]求助三个问题

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发表于 2010-12-6 14:16:04 | 显示全部楼层 |阅读模式

第一次接触蛋白的NMR谱的操作,很多问题不懂,求助:

# s% y- r& ?! E0 d# q

1、是不是基本上所有的蛋白样品都需要压水峰啊?那么1H的90°脉冲的测试,是在1D压水峰谱的情况下做的吗?

9 s5 } Z) I7 f, Y; V: C

2、另外做2D、3D谱时,要定标吗?是用sr值来定吗?具体怎么操作的哦?

1 i5 g$ f' S& f; `" P6 D* }" e

3、15N-1H的NOE值是负的吗?NOE的正负与什么有关系啊?

: p; d& e. O. Y5 B4 F2 I7 x, \2 x

问题比较多,还希望大家能多多帮助,先谢啦!

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发表于 2010-12-6 16:37:40 | 显示全部楼层
抢沙发,坐等回帖高手,学习.......
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发表于 2010-12-7 15:36:05 | 显示全部楼层

1.蛋白一般都要压水峰,压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

+ H" l; w/ r( _- }/ m" J

2.2D,3D要定标,具体操作视操作仪器而定

( r5 G( n* C8 ?& M

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢;而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

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发表于 2010-12-7 22:02:55 | 显示全部楼层
1. 基本上所有的蛋白样品都需要压水峰,因使用90%H2O。 . V4 Z6 r4 W3 t$ X2 m% H# Y 1H的90°脉冲的测试是在1D压水峰谱的情况下做的,9 v! j9 v; U, E7 s( z; {: ^! Y% P9 f 如此才能见到峰呀。 , P2 h6 C+ Z; W$ p. `2. SR请参考Journal of Biomolecular NMR, 6(1995),135-1403 e5 p. R$ E8 w! d$ p9 s 3. 太复杂,关注中
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 楼主| 发表于 2010-12-8 13:12:45 | 显示全部楼层
学习了,谢谢大家,希望高手能回答第三个问题啊
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 楼主| 发表于 2010-12-8 13:13:36 | 显示全部楼层
以下是引用fangjing在2010-12-7 15:36:05的发言:
+ t! | p8 ]3 A- ?2 d2 T

1.蛋白一般都要压水峰,压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

* u! R0 j( S( l* U. S! f

2.2D,3D要定标,具体操作视操作仪器而定

, ]: ^& J, g3 @6 q& _: D

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢;而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

! |, r8 X* u* ?" |# s1 B7 d7 f. H

第三个问题,还是不太懂啊

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