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[求助]蛋白核磁的几个问题

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发表于 2006-12-12 13:54:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
1.我要做蛋白(390KD)的样子,但是浓度才4%左右(质量浓度),做碳谱。但是好象效果不是很好,只出来4个峰。请问,浓度要到多少做碳谱才能效果好啊。
2.我们用的是Bruker-400的,好象测试的时候有自带的一套程序,按照那套程序做就可以了么。我看到论坛上很多讨论做法的帖子,觉得有点奇怪,因为仪器有自带的程序啊。
请高手帮我啊
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发表于 2007-4-22 19:42:55 | 显示全部楼层
高分子做碳谱,参数有所不同.因为峰的T2通常比较短,不需要长时间的AQ,采集信号的时间太长反而增加噪音的强度. 你可以尝试缩短AQ, 通常做法不是直接改变AQ, 而是把TD减少,如果你平常测碳谱用的TD是64K或32K,现在你可以减少到16K甚至8K,这样就间接缩短了AQ值. 另外你的分子很大,样品浓度太低.本来就可能做不好, 不如测定HSQC来间接观察C. 如果一定要C谱, 建议做一个长周末,样品中加入弛豫试剂,就是含铬试剂,这样就可以用很短的等待时间,很短的采样时间,NS可以非常大.效果要好很多!
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发表于 2007-4-23 11:21:01 | 显示全部楼层

390KD protein is oversize for protein NMR, what do you want to see?

Paramagnetic shift or just normal C/H?

Also, did you 13C labeled your protein?

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