[求助]求助三个问题

BIOWM

第一次接触蛋白的NMR谱的操作，很多问题不懂，求助：

% ~4 U4 T% v- ?/ H8 f# W/ d

1、是不是基本上所有的蛋白样品都需要压水峰啊？那么1H的90°脉冲的测试，是在1D压水峰谱的情况下做的吗？

) O8 l# b' L! F; `

2、另外做2D、3D谱时，要定标吗？是用sr值来定吗？具体怎么操作的哦？

) B' d* \ ?* v6 W n; M- n

3、15N-1H的NOE值是负的吗？NOE的正负与什么有关系啊？

问题比较多，还希望大家能多多帮助，先谢啦！

revil2010

抢沙发，坐等回帖高手，学习.......

fangjing

1.蛋白一般都要压水峰，压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

2.2D，3D要定标，具体操作视操作仪器而定

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢；而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

submarine

1. 基本上所有的蛋白样品都需要压水峰,因使用90%H2O。 ' m$ \& u1 ]% a! f9 N, H 1H的90°脉冲的测试是在1D压水峰谱的情况下做的， . t2 `2 q( v9 T$ X; n 如此才能见到峰呀。 . [ T# n4 _' H8 _. |2. SR请参考Journal of Biomolecular NMR, 6(1995),135-140 3. 太复杂，关注中

BIOWM

学习了，谢谢大家，希望高手能回答第三个问题啊

BIOWM

以下是引用fangjing在2010-12-7 15:36:05的发言：

1.蛋白一般都要压水峰，压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

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2.2D，3D要定标，具体操作视操作仪器而定

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢；而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

: R* j) d& E1 ~9 _' T7 O. C

第三个问题，还是不太懂啊