[求助]为何蛋白质样品都用90%H2O+10%D2O作为溶剂

BIOWM · 发表于 2010-8-2 10:15:23

本人刚接触生物样品，发现大部分的蛋白质样品都用90%H2O+10%D2O作为溶剂。向大家请教两个问题：

1、为什么要用含90%的H2O呢，是因为蛋白质是亲水性的，而这个环境更接近于蛋白质的真实环境吗？那溶剂峰和水峰的出峰位置各在哪里呢？

2、一般测试时要求的Ph值是多少?

还望各位老师指导，不胜感激！

amtblcd · 发表于 2010-8-2 18:04:48

1,
人体内的生理条件主题是水，
溶剂峰取决于用的缓冲液，水峰在4.75ppm

2
一般在6.0-7.5之间
个人倾向于6.0-6.5

BIOWM · 发表于 2010-8-3 12:25:06

溶剂峰取决于用的缓冲液---是什么意思，不太明白，还麻烦老师解释一下。

另外，若仅使用氘水作为溶剂可以吗？使用其他有机氘代溶剂，会对蛋白质有影响的吧？谢谢！

submarine · 发表于 2010-8-5 00:11:58

用含90%的H2O时, NH及OH 之讯息才不会被10%的D2O完全交换掉,NH及OH亦为观察重点

submarine · 发表于 2010-8-5 00:17:25

蛋白质最后目的是生物体，生物体内不用机氘代溶剂吧

BIOWM · 发表于 2010-8-5 08:57:44

以下是引用submarine在2010-8-5 0:11:58的发言：
用含90%的H2O时, NH及OH 之讯息才不会被10%的D2O完全交换掉,NH及OH亦为观察重点

还有活泼氢的问题，是这样的，谢谢老师！

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