本人以前是做多肽结构的,现有一90残基的15N标记蛋白想测结构,有些问题想请教做过的各位大师,请好心人指点,谢谢! 3 ^, s& s9 n, ]( m, S4 e, B
: D8 b. m; W% o! q H, x% t/ l问题1:前期准备工作应做哪些?我现在知道的有以下几个,不知是否必要,
/ T& R# h/ T2 @; _* K6 j6 ]1. 蛋白样品的1H90度(是否需要用zgpr压水) * i6 E2 I% r0 `* o4 M# q T/ s. e
2.15N的90度 ) Q/ f7 p7 Z# }( m* ~
3.1H-15N HSQC(是否必须?) 5 n% j% G8 G! P
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问题2:只是15N标记,要测的三维实验有哪些,我知道的有:15N-TOCSY,15N-NOESY,不知是否还需测HNHA,HNHB,我用CYANA算结构
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问题3:我的样品浓度能到1.5mM,不知ns设多少合适,一个三维实验大概需要多长时间? 1 [6 k% a, ]8 F4 A1 N m
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