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[求助]求助三个问题

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发表于 2010-12-6 14:16:04 | 显示全部楼层 |阅读模式

第一次接触蛋白的NMR谱的操作,很多问题不懂,求助:

2 h% N7 l2 i$ o' o+ R

1、是不是基本上所有的蛋白样品都需要压水峰啊?那么1H的90°脉冲的测试,是在1D压水峰谱的情况下做的吗?

, b4 J( m, Z6 p/ N# k/ O* S

2、另外做2D、3D谱时,要定标吗?是用sr值来定吗?具体怎么操作的哦?

7 C0 s0 \; C' j. y8 S1 _7 r; x2 J; n

3、15N-1H的NOE值是负的吗?NOE的正负与什么有关系啊?

0 o3 {* c2 V0 u! P, I2 C

问题比较多,还希望大家能多多帮助,先谢啦!

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发表于 2010-12-6 16:37:40 | 显示全部楼层
抢沙发,坐等回帖高手,学习.......
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发表于 2010-12-7 15:36:05 | 显示全部楼层

1.蛋白一般都要压水峰,压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

$ Q/ T6 t4 ]: l' c

2.2D,3D要定标,具体操作视操作仪器而定

N" p$ e, u' _ @

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢;而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

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发表于 2010-12-7 22:02:55 | 显示全部楼层
1. 基本上所有的蛋白样品都需要压水峰,因使用90%H2O。' z! J. J. {* f! ` 1H的90°脉冲的测试是在1D压水峰谱的情况下做的, % b6 {; K* Y4 R4 L( |4 ] 如此才能见到峰呀。5 f& O# a) j# ^. e2 @ 2. SR请参考Journal of Biomolecular NMR, 6(1995),135-140 8 I- V$ n4 B& U3 ]" P4 |3. 太复杂,关注中
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 楼主| 发表于 2010-12-8 13:12:45 | 显示全部楼层
学习了,谢谢大家,希望高手能回答第三个问题啊
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 楼主| 发表于 2010-12-8 13:13:36 | 显示全部楼层
以下是引用fangjing在2010-12-7 15:36:05的发言:
( T9 r+ w2 p- P9 S2 }$ l, l$ y

1.蛋白一般都要压水峰,压水峰的时候做90度脉宽应该不准的。

+ G% Q4 B: B& N

2.2D,3D要定标,具体操作视操作仪器而定

$ Y% b4 y% q3 |/ }& i! a

3.蛋白质在水溶液中,翻转慢(slow tumbling),弛缓(relaxation)快,核子欧豪效应(Nuclear Overhauser Effect,NOE)为负值(绝对值大),扩散慢;而小配体,翻转快,弛缓慢,NOE为正值(绝对值小),扩散快

. s* I+ K% O) Y1 \4 Y9 Z* M

第三个问题,还是不太懂啊

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