本人以前是做多肽结构的,现有一90残基的15N标记蛋白想测结构,有些问题想请教做过的各位大师,请好心人指点,谢谢!
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问题1:前期准备工作应做哪些?我现在知道的有以下几个,不知是否必要, 8 F' e b2 F- T0 z
1. 蛋白样品的1H90度(是否需要用zgpr压水) : s* n( W: _! H3 W! J
2.15N的90度 1 I, V8 z- Z7 L: s! t$ t
3.1H-15N HSQC(是否必须?) & g B9 h* s( A, d
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问题2:只是15N标记,要测的三维实验有哪些,我知道的有:15N-TOCSY,15N-NOESY,不知是否还需测HNHA,HNHB,我用CYANA算结构
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6 v0 S! C5 L* _, R G问题3:我的样品浓度能到1.5mM,不知ns设多少合适,一个三维实验大概需要多长时间? ! `. N2 b+ R, M" j6 c
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